1.Qu'est-ce que la culture cellulaire ?
La culture cellulaire consiste à retirer des cellules d'animaux ou de plantes, puis à les cultiver dans un environnement artificiel favorable.Les cellules peuvent être prélevées directement du tissu et décomposées par des moyens enzymatiques ou mécaniques avant la culture, ou elles peuvent provenir de lignées cellulaires établies ou de lignées cellulaires.
2.Qu'est-ce que la culture primaire ?
La culture primaire fait référence à l'étape de culture après que les cellules sont séparées du tissu et prolifèrent dans des conditions appropriées jusqu'à ce qu'elles occupent tous les substrats disponibles (c'est-à-dire qu'elles atteignent la confluence).A ce stade, les cellules doivent être sous-cultivées en les transférant dans un nouveau récipient avec un milieu de croissance frais pour fournir plus d'espace pour une croissance continue.
2.1 Lignée cellulaire
Après la première sous-culture, la culture primaire est appelée lignée cellulaire ou sous-clone.Les lignées cellulaires dérivées de cultures primaires ont une durée de vie limitée (c'est-à-dire qu'elles sont limitées ; voir ci-dessous), et lors de leur passage, les cellules ayant la capacité de croissance la plus élevée dominent, ce qui entraîne un certain degré de génotype dans la population compatible avec le phénotype.
2.2 Souche cellulaire
Si une sous-population d'une lignée cellulaire est positivement sélectionnée à partir de la culture par clonage ou par une autre méthode, la lignée cellulaire deviendrait une souche cellulaire.Les souches cellulaires acquièrent généralement des modifications génétiques supplémentaires après le début de la lignée parentale.
3. Lignées cellulaires limitées et continues
Les cellules normales ne se divisent généralement qu'un nombre limité de fois avant de perdre la capacité de proliférer.Il s'agit d'un événement génétiquement déterminé appelé sénescence ;ces lignées cellulaires sont appelées lignées cellulaires finies.Cependant, certaines lignées cellulaires deviennent immortelles grâce à un processus appelé transformation, qui peut se produire spontanément ou peut être induit par des produits chimiques ou des virus.Lorsqu'une lignée cellulaire finie subit une transformation et acquiert la capacité de se diviser indéfiniment, elle devient une lignée cellulaire continue.
4. Condition de culture
Les conditions de culture de chaque type cellulaire sont très différentes, mais l'environnement artificiel pour la culture des cellules est toujours composé d'un récipient adapté, qui contient les éléments suivants :
4.1 Substrat ou milieu de culture apportant les nutriments essentiels (acides aminés, glucides, vitamines, minéraux)
4.2 Facteurs de croissance
4.3 Hormones
4.4 Gaz (O2, CO2)
4.5 Environnement physique et chimique régulé (pH, pression osmotique, température)
La plupart des cellules dépendent de l'ancrage et doivent être cultivées sur un substrat solide ou semi-solide (culture adhérente ou monocouche), tandis que d'autres cellules peuvent se développer en flottant dans le milieu (culture en suspension).
5. Cryoconservation
S'il y a des cellules en excès dans la sous-culture, elles doivent être traitées avec un agent protecteur approprié (tel que le DMSO ou le glycérol) et stockées à une température inférieure à -130°C (cryoconservation) jusqu'à ce qu'elles soient nécessaires.Pour plus d'informations sur la sous-culture et la cryoconservation des cellules.
6.Morphologie des cellules en culture
Les cellules en culture peuvent être divisées en trois catégories de base en fonction de leur forme et de leur apparence (c'est-à-dire leur morphologie).
6.1 Les cellules fibroblastes sont bipolaires ou multipolaires, ont une forme allongée et se développent attachées au substrat.
6.2 Les cellules de type épithélial sont polygonales, ont une taille plus régulière et sont attachées à la matrice en feuillets discrets.
6.3 Les cellules de type lymphoblaste sont sphériques et se développent généralement en suspension sans se fixer à la surface.
7.Application de la culture cellulaire
La culture cellulaire est l'un des principaux outils utilisés en biologie cellulaire et moléculaire.Il fournit un excellent système modèle pour étudier la physiologie et la biochimie normales des cellules (telles que la recherche métabolique, le vieillissement), les effets des médicaments et des composés toxiques sur les cellules, ainsi que la mutagenèse et les effets cancérigènes.Il est également utilisé pour le criblage et le développement de médicaments et la fabrication à grande échelle de composés biologiques (tels que des vaccins, des protéines thérapeutiques).Le principal avantage de l'utilisation de la culture cellulaire pour l'une de ces applications est la cohérence et la reproductibilité des résultats qui peuvent être obtenus à l'aide d'un lot de cellules clonées.
Heure de publication : 03 juin 2019