La lignée cellulaire rendue plus simple et plus efficace

1.Choisir la bonne lignée cellulaire
Lors du choix de la lignée cellulaire appropriée pour votre expérience, veuillez tenir compte des critères suivants :
a. Espèce : les lignées cellulaires non humaines et non primates ont généralement moins de restrictions en matière de biosécurité, mais en fin de compte, votre expérience déterminera s'il convient d'utiliser une culture d'une espèce particulière.
b.Caractéristiques : quel est le but de votre expérience ?Par exemple, les lignées cellulaires dérivées du foie et des reins peuvent être plus appropriées pour les tests de toxicité.
c.Limitée ou continue : bien que le choix d'une lignée cellulaire limitée puisse vous offrir plus d'options pour exprimer la fonction correcte, les lignées cellulaires continues sont généralement plus faciles à cloner et à entretenir.
d. Normales ou transformées : les lignées cellulaires transformées ont généralement un taux de croissance plus élevé et une efficacité d'ensemencement plus élevée, sont continues et nécessitent moins de sérum dans le milieu de culture, mais leur phénotype a subi des modifications permanentes par transformation génétique.
e.Conditions et caractéristiques de croissance : Quelles sont vos exigences en matière de vitesse de croissance, de densité de saturation, d'efficacité de clonage et de capacité de croissance en suspension ?Par exemple, pour exprimer des protéines recombinantes avec des rendements élevés, vous devrez peut-être sélectionner des lignées cellulaires qui ont des taux de croissance rapides et la capacité de se développer en suspension.
f. Autres critères : si vous utilisez une lignée cellulaire limitée, y a-t-il suffisamment de stock disponible ?La lignée cellulaire est-elle entièrement caractérisée ou devez-vous la vérifier vous-même ?Si vous utilisez une lignée cellulaire anormale, existe-t-il une lignée cellulaire normale équivalente pouvant servir de témoin ?La lignée cellulaire est-elle stable ?Si non, est-il facile de le cloner et de générer suffisamment de stock congelé pour votre expérience ?

2.Obtenir des lignées cellulaires
Vous pouvez construire votre propre culture à partir de cellules primaires, ou vous pouvez choisir d'acheter des cultures cellulaires établies auprès de fournisseurs commerciaux ou à but non lucratif (c'est-à-dire des banques de cellules).Des fournisseurs réputés fournissent des lignées cellulaires de haute qualité dont l'intégrité a été soigneusement testée et garantissent que la culture est exempte de contaminants.Nous vous recommandons de ne pas emprunter de cultures à d'autres laboratoires car ils présentent un risque élevé de contamination des cultures cellulaires.Quelle que soit sa source, veuillez vous assurer que toutes les nouvelles lignées cellulaires ont été testées pour la contamination par les mycoplasmes avant de commencer à les utiliser.